這里介紹一篇發(fā)表在Marine Drugs期刊上的文章，題目是《深共晶溶劑-雙水相體系高效純化條斑紫菜R-藻紅蛋白》，通訊作者為哈爾濱工業(yè)大學(xué)（威海）環(huán)境科學(xué)與工程、海洋科學(xué)學(xué)院的王全富教授。引用信息為Marine Drugs. 2020 Dec;18(12):618
其中，圓二色光譜為Bio-Logic公司的MOS-500機型測得，用于檢測蛋白樣品的二級結(jié)構(gòu)，并對比兩種純化方法的結(jié)果差異。
條斑紫菜中富含R-藻紅蛋白（R-PE），是一種海洋生物活性蛋白。本研究采用深共晶溶劑-雙水相體系（DES-ATPS）結(jié)合硫酸銨沉淀法對R-PE進行了純化，并采用一定的工藝進行了表征。首先，選擇氯化膽堿-尿素（ChCl-U）作為合適的DES形成ATPS用于R-PE的提取。然后進行單因素實驗，在最佳條件下（0.040mg R-PE加入0.35g/K2HPO4（0.8g/mL，0.5ml）提取20min），R-PE的純度（A565/A280）為3.825，收率為69.99%（w/w）。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）結(jié)果表明，純化的R-PE含有三條主帶。純化后，在native-PAGE上出現(xiàn)一條帶。紫外-可見光譜在495、540和565nm處有特征吸收峰。在495nm激發(fā)時，R-PE的發(fā)射波長為570nm。所有光譜結(jié)果表明，R-PE的結(jié)構(gòu)在整個過程中保持不變，證明了該方法的有效性。透射電子顯微鏡（TEM）顯示，聚集和周圍現(xiàn)象是R-PE萃取的驅(qū)動力。本研究為藥物開發(fā)提供了一種綠色、簡便的R-PE純化方法。
